ELISA試劑盒常見實(shí)驗(yàn)條件選用

如何正確使用酶結(jié)合物？

1.酶結(jié)合物的稀釋液

在稀釋液中常加入高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)(例如1%BSA或5%脫脂奶粉),通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附.一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑,如吐溫20(0.05%的濃度較為適宜).

2.正確稀釋酶結(jié)合物

酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定,濃度過(guò)高易導(dǎo)致本底偏高,濃度過(guò)低則會(huì)導(dǎo)致陽(yáng)性信號(hào)的減弱.

酶結(jié)合物*好在使用前稀釋,稀釋后的酶結(jié)合物不宜長(zhǎng)期保存,因?yàn)榈蜐舛鹊拿附Y(jié)合物極易失活.