細(xì)胞凍存
1 選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞。選擇匯合度70%左右的細(xì)胞。
2 凍存液的配制,確定你的配方?jīng)]有問題?
3 DMSO對(duì)細(xì)胞有毒性,把細(xì)胞加到凍存管后標(biāo)記好馬上放入凍存盒然后放入-80冰箱,過夜后轉(zhuǎn)移至液氮。(有人說-80放時(shí)間長不好,4h后轉(zhuǎn)移至液氮,這個(gè)具體不清楚啦)
4 DMSO稀釋時(shí)放熱,所以提前10min左右配制好凍存液
凍存液配置和凍存程序是沒問題的,因?yàn)檫€同時(shí)凍存了幾管密度90%的同種細(xì)胞,復(fù)蘇后長的不錯(cuò)。只是這次復(fù)蘇因?yàn)榕囵B(yǎng)基換了牌子,所以不知道是培養(yǎng)基的問題,還是因?yàn)榧?xì)胞凍存時(shí)密度低,凍存效果不好的原因。
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