ELISA試劑盒實驗前應(yīng)做哪些準(zhǔn)備
1、仔細(xì)閱讀說明書,確定試劑盒在有效期內(nèi)。 2、按說明書確定所有試劑是否齊全,完整的Sunny ELISA檢測試劑盒包含預(yù)包被酶標(biāo)板,檢測抗體、鏈霉親合素標(biāo)記的HRP、標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、TMB顯色液、終止液、洗液等10個組分,另外要確認(rèn)試劑盒以外的材料是否齊全,如酶標(biāo)儀、移液器及槍頭、加樣槽、離心管、量筒、蒸餾水、稀釋用聚丙烯試管等。 3、實驗前,將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置半個小時,以讓試劑恢復(fù)到室溫。 4、將10×的檢測緩沖液(Assay Buffer)稀釋到1×,吸取10X濃縮Assay buffer 5mL至50mL離心管,加蒸餾水至 50Ml,震蕩混勻備用。 ELISA試劑盒實驗結(jié)果分析: 一、孵育完畢后取出微孔板,如果采用水浴法,用吸水紙吸干外壁的水分。 二、在微孔后面放置一張白紙并觀察孔內(nèi)的顏色變化,從微孔壁側(cè)面所能觀察的顏色比從頂部或者底部所能觀察到的更準(zhǔn)確。 三、有時候孵育時在微孔側(cè)旁會出現(xiàn)氣泡,可以在沒有氣泡的另一側(cè)進(jìn)行觀察,對于一些顏色介于陰性和陽性質(zhì)控的樣品,需要進(jìn)行更進(jìn)一步的分析和重測。 四、試劑的準(zhǔn)備孔板(條或孔)和陽性和陰性質(zhì)控臨用前取出,應(yīng)在室溫下放置至少半小時,不使用的微孔板應(yīng)置于2-8°C保存,剩余的陽性和陰性質(zhì)控應(yīng)放回原處冰凍保存。
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