ELISA實(shí)驗(yàn)背景色過(guò)高的主要原因及解決方法

1、不正確的洗滌

洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會(huì)導(dǎo)致背景色過(guò)高。

解決方法：檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟；確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。

2、底物污染

確保在使用前，底物不被金屬離子或氧化劑污染；在實(shí)驗(yàn)時(shí)留存一些額外的底物，底物本身不應(yīng)該有顏色。

3、底物曝光

底物曝光會(huì)使底物變成藍(lán)色，因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶?jī)?nèi))。

4、HRP的錯(cuò)誤稀釋

HRP濃度過(guò)高會(huì)造成高背景色，因此要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)稀釋。

5、錯(cuò)誤的孵育時(shí)間和溫度

必須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)來(lái)定孵育時(shí)間和溫度。

6、包被板保存不當(dāng)

如果包被板只用了一部分，一定要正確保存剩余的板條。