小鼠腫瘤壞死因子α檢測試劑盒
貨號(hào)HZC102a.96
名稱Mouse TNF-α ELISA kit
規(guī)格96T
靈敏度16pg/ml
檢測范圍31.2-2000pg/ml
樣本類型血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清
樣本用量100 μl小鼠腫瘤壞死因子α檢測試劑盒
類型雙抗體夾心法
小鼠TNF-α簡介:
早在三四十年代,人們就發(fā)現(xiàn)內(nèi)**能引起小鼠移植腫瘤的出血壞死。1975年,Carswell等人發(fā)現(xiàn)卡介苗攻擊小鼠后再用內(nèi)**處理,小鼠血清中出現(xiàn)一種能誘導(dǎo)腫瘤組織出血壞死的物質(zhì),故命名為腫瘤壞死因子。TNF還稱為惡液素(cachectin),這是因?yàn)樗芤鸺毙曰蚵愿腥緞?dòng)物的惡液質(zhì)狀態(tài)。TNF-a的生物學(xué)活性非常復(fù)雜,包括對造血、**和炎癥的調(diào)節(jié);對血管和凝血的影響和對多種器官(肝、心臟、骨、軟骨、肌肉和其它組織)的作用等。TNF-a對不同的細(xì)胞有不同的作用:殺傷細(xì)胞,抑制、促進(jìn)或不影響細(xì)胞生長。TNF-a能誘導(dǎo)敏感細(xì)胞凋亡。TNF-a能快速、強(qiáng)烈、不可逆地抑制紅細(xì)胞系前體(CFU-ET和BFU-E)和紅系、小鼠腫瘤壞死因子α檢測試劑盒粒系腫瘤細(xì)胞(K562、HE2、HL-60)的生長,這種抑制作用不需要**細(xì)胞或巨噬細(xì)胞的輔助,受抑制細(xì)胞必須表達(dá)TNF-a受體。TNF-a能促進(jìn)人的成纖維細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)EGFR和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,胰島素和EGF增強(qiáng)TNF-a的這一作用。TNF-a能抑制造血,引起紅細(xì)胞生成減少、破壞增加。TNF-a也能誘導(dǎo)T細(xì)胞表達(dá)MHC-Ⅱ類分子和高親和力IL-2受體。TNF-a能增加組織因子的表達(dá),抑制抗凝蛋白C的輔助因子活性,從而引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的前凝血活性。TNF-a能促進(jìn)骨細(xì)胞生長和合成DNA,抑制堿性磷酸酶活性使骨形成受阻,在骨質(zhì)吸收和重建中起重要作用。TNF-a能降低骨骼肌胞漿膜的靜息電位,增加細(xì)胞內(nèi)鈉離子濃度,使血管內(nèi)鈉離子減少(稱為第三空間性丟失),這種情況在休克和危象病癥中經(jīng)常出現(xiàn)。
操作注意事項(xiàng):
◆實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
◆酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)把小鼠腫瘤壞死因子α檢測試劑盒立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
◆建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
◆若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)。
◆標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有**污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
◆凍結(jié)標(biāo)本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。
◆渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。
◆反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
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