高純度質(zhì)粒小提中量快速提取試劑盒(離心柱型)產(chǎn)品介紹
    本試劑盒采用改進(jìn)SDS-堿裂解法裂解細(xì)胞，離心吸附柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜在高鹽、低pH值狀態(tài)下選擇性地結(jié)合溶液中的質(zhì)粒DNA，再通過去蛋白液和漂洗液將雜質(zhì)和其它**成分去除，*后低鹽、高pH值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。 
高純度質(zhì)粒小提中量快速提取試劑盒(離心柱型)產(chǎn)品特點(diǎn)
    1. 離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定
      的弊端。
    2. 獨(dú)有的去蛋白液配方，可以高效去除殘留的核酸酶，即使是核酸酶含量豐富的菌株如JM系列、HB101也可以輕松去除。有效防止了質(zhì)粒被核
      酸酶降解。
    3. 快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高、純度好，可以直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、體
      外轉(zhuǎn)錄、測(cè)序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
    4. 可從5～15ml大腸桿菌LB培養(yǎng)液中，可快速提取多至70μg高純度的高拷貝質(zhì)粒DNA，提取率達(dá)85～90﹪。 
高純度質(zhì)粒小提中量快速提取試劑盒(離心柱型)產(chǎn)品儲(chǔ)存
    本產(chǎn)品收到后按照說明書指示溫度存放各成份，儲(chǔ)存18個(gè)月不影響使用效果。 

自備試劑

    無水乙醇

高純度質(zhì)粒小提中量快速提取試劑盒(離心柱型)注意事項(xiàng)

    1. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī)，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。

    2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要用大量清水或者生

       理鹽水沖洗。

    3. 提取質(zhì)粒的量與**培養(yǎng)濃度、質(zhì)?？截悢?shù)等因素有關(guān)。一般高拷貝質(zhì)粒，建議接種單菌落于1.5-4.5ml加合適***的LB培養(yǎng)基，過夜培高純度質(zhì)粒小提中量快速提取試劑盒(離心柱型)

       養(yǎng)14-16個(gè)小時(shí)，可提取出多達(dá)20μg的純 凈質(zhì)粒。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10kb的大質(zhì)粒，應(yīng)適當(dāng)加大菌體使用量，使用5-10ml

       過夜培養(yǎng)物，同時(shí)按比例增加P1、P2、P3的用量，其它步驟相同。

    4. 得到的質(zhì)粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可

       能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構(gòu)象質(zhì)粒泳動(dòng)位置不一造成，與提取物培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短、提取時(shí)操作劇烈程度等有關(guān)。

       本公司產(chǎn)品正常操作情況下基本超螺旋可以超過90%。

    5. 質(zhì)粒DNA確切分子大小，必須酶切線性化后，對(duì)比DNA分子量Marker才可以知道。處于環(huán)狀或者超螺旋狀態(tài)的的質(zhì)粒，泳動(dòng)位置不確定，無法

       通過電泳知道其確切大小。

    6. 洗脫液EB不含有螯合劑EDTA，不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫，但應(yīng)該確保pH大于7.5，pH過低影響洗脫效率。用水洗脫

       質(zhì)粒應(yīng)該保存在－20℃。質(zhì)粒DNA如果需要長(zhǎng)期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響下

       游酶切反應(yīng)，使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。