pSURE -T Simple載體連接試劑盒產(chǎn)品介紹
pSURE-T Simple Vector是一種高效克隆PCR產(chǎn)物 (TA Cloning) 的專用載體。這種載體是由pUC19載體改建而成,和傳統(tǒng)T載體ECOR V切開(kāi)后加T方法不同,pSURE-T Simple 通過(guò)改造pUC19,在原pUC19多克隆位點(diǎn)引入 Xcm I酶切后使其原多克隆位點(diǎn)兩側(cè)的3’末端直接產(chǎn)生未配對(duì)的T堿基,因此有更高的重組效率。同時(shí)它消除了pUC19載體上的多克隆酶切位點(diǎn),克隆后的PCR產(chǎn)物將無(wú)法使用載體上的限制酶切下,需要在PCR擴(kuò)增引物上導(dǎo)入合適的酶切位點(diǎn)。此時(shí)如果使用PCR擴(kuò)增引物導(dǎo)入的酶切位點(diǎn)進(jìn)行DNA酶切時(shí),酶切反應(yīng)將不會(huì)受到T載體上其它多克隆酶切位點(diǎn)上的限制酶影響,可以大大提高酶切效率,增加亞克隆成功率。這種載體盡管消除了LacZ基因上的多克隆酶切位點(diǎn),但不影響b-半乳糖苷酶的正常表達(dá),因此,PCR產(chǎn)物克隆后仍可以利用a-互補(bǔ)性進(jìn)行藍(lán)白菌落的篩選, 挑選陽(yáng)性克隆。由于這種載體是以pUC19載體為基礎(chǔ)構(gòu)建而成,所以它們具有同pUC19載體相同的功能。 pSURE -T Simple載體連接試劑盒
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 連接帶有A尾的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行TA克隆。
2. 可以通過(guò)藍(lán)白斑顯色進(jìn)行陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子篩選。
3. 陽(yáng)性克隆可以使用通用引物M13F,M13R進(jìn)行鑒定和測(cè)序。
4. 去除多克隆位點(diǎn),酶切反應(yīng)不會(huì)受到干擾。
pSURE -T Simple載體連接試劑盒產(chǎn)品儲(chǔ)存
-20 ℃ 保存,反復(fù)凍融至少10次不影響使用質(zhì)量。
pSURE-T Simple載體圖譜pSURE -T Simple載體連接試劑盒