多克隆抗體（polyclonal antibody, pAb）是指用含有多個(gè)抗原決定簇的抗原**動(dòng)物后刺激機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體，得到的**血清含有多種抗體。多克隆抗體可應(yīng)用于WB、IHC、Elisa、IP等實(shí)驗(yàn)中，是生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域不可或缺的研究伙伴。下面我們會(huì)來介紹一下多克隆抗體的制備過程。

1. 上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)多克隆抗體**原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為**原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有**原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. **動(dòng)物
選擇動(dòng)物時(shí)應(yīng)考慮抗原和**動(dòng)物的種屬差異，種系相近會(huì)影響**效果，一般要求動(dòng)物適齡，健康，體重符合要求。常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。動(dòng)物接受**的乳液量小鼠為1.0~2.0 ml，家兔為2~4 ml。添加佐劑可幫助抗原在注射部位緩慢釋放，增加**效果，常用佐劑為弗氏不完全佐劑。
初次**后要經(jīng)過2~3次以上的加強(qiáng)**以形成較高水平的IgG抗體。初次**和再次**之間，小動(dòng)物一般間隔10~14天，大動(dòng)物間隔60天左右。在每次加強(qiáng)**后，進(jìn)行抗血清效價(jià)測(cè)定，當(dāng)效價(jià)達(dá)到理想狀態(tài)時(shí)，便采集抗血清。
3. 上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)多克隆抗體**血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。也可采用尾巴或眼眶取血，靜置待血液凝固成血塊收縮析出血清，3000rpm離心15 min，取上清。這個(gè)過程要注意動(dòng)物的養(yǎng)護(hù)，耗時(shí)長(zhǎng)，但得率低，得到的血清還需進(jìn)一步的純化。
4. **血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5.上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)多克隆抗體 **血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)**并添加防腐劑。

由于多克隆抗體具有成本低、制備周期短且制備步驟相對(duì)簡(jiǎn)單、可識(shí)別多個(gè)表位等優(yōu)點(diǎn)，在科研領(lǐng)域應(yīng)用非常廣泛。以上就是關(guān)于多克隆抗體制備的一個(gè)基本流程。供大家參考。

上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)多克隆抗體