三氯醋酸是分子生物學研究中常用的一項技術。質粒是細胞內的一種環(huán)狀的小分子DNA,是進行DNA重組的常用載體。作為一個具有自身復制起點的復制單位獨立于細胞的主染色體之外,質粒DNA上攜帶了部分的基因信息,經過基因表達后使其宿主細胞表現相應的性狀。在DNA重組中,質?;蚪涍^改造后的質粒載體可通過連接外源基因構成重組體。從宿主細胞中提取質粒DNA,是DNA重組技術中*基礎的實驗技能。提取質粒DNA有三個步驟:培養(yǎng)**使質粒擴增,收集和裂解**,分離和純化質粒DNA。
常規(guī)的使用小提試劑盒提取得到的質粒,并不適合用來轉染細胞,三氯醋酸其原因在于:(1)小提質粒濃度較低,一般僅為0.1~0.2ug/ul。而用質粒轉染細胞,一般至少需要2~5ug左右,如果使用小提質粒,只能加大上樣量,這樣對轉染操作會有一定影響;(2)小提質粒純度不夠,且內**含量較高,會對目的細胞有一定毒性,影響轉染效率。
產品特點:1.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好??朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。
2. 使用了上等溶膠液,不含傳統溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應。
3.三氯醋酸獨特的溶膠液/結合液配方,將溶膠和結合兩種功能統一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產物清潔純化、酶切產物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用。
4.溶膠液/結合液調制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到*佳結合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在*佳結合范圍內。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,三氯醋酸也不需要乙醇沉淀。
適用范圍;適用于瓊脂糖凝膠DNA回收、PCR反應產物純化回收、酶切產物DNA片斷純化回收、探針標記后純化回收、DNA樣品濃縮等。儲存事項:所有的溶液應該是澄清的,如果環(huán)境溫度低時溶液可能形成沉淀,此時不應該直 接使用,可在37℃水浴加熱幾分鐘,即可恢復澄清。使用前應該恢復到室溫。儲存于低溫(4℃或者-20℃)會造成溶液沉淀,影響使用效果,因此運輸和儲存 均在室溫下(15℃-25℃)進行。避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應及時 蓋緊蓋子。
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