霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基
(Chromogenic Vibrio Cholerae Agar)
用 途:
霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基用于水產(chǎn)品及食物中毒樣品中霍亂弧菌的分離和鑒定。
霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發(fā)酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非霍亂弧菌**,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;色素與霍亂弧菌所具有的酶發(fā)生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產(chǎn)生綠-藍綠色的菌落。
霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基配方(每升):
蛋白胨 15g
酵母膏粉 5g
蔗糖 10g
氯化鈉 5g
抑菌劑 5g
瓊脂 13g
色素 3.1g
*終pH 9.0±0.2
霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基使用方法
1、取瓶內(nèi)干粉56.1克,用100ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至完全溶解,不需高壓**,冷至約50℃,傾注**平皿。
2、以無菌操作取檢樣25 g(mL),加入堿性蛋白胨水225 mL,用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以8 000 r/min均質(zhì)1 min,或拍擊式均質(zhì)器拍擊2 min,制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質(zhì)器,則將樣品放入無菌乳缽中磨碎,然后放在500 mL的**容器內(nèi),加225 mL堿性蛋白胨水,并充分振蕩。
3、增菌:將上述1:10稀釋液于36 ℃±1 ℃培養(yǎng)6h~8h,如有需要可進行二次增菌。
4、分離
在增菌液中用接種環(huán)取一環(huán),于霍亂弧菌顯色平板上劃線分離,于36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h~24 h。
5、通過驗證試驗進一步確認假定性霍亂弧菌,如氧化酶、革蘭氏染色等。
質(zhì)量控制:
本品傾注平皿后呈淡黃色,下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18-24小時生長情況如下表:
霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基注:*后的鑒定須做補充試驗。
外觀:
脫水培養(yǎng)基:淺黃色具流動性粉未。
制備好平板:淡黃色的膠。
儲存條件和保質(zhì)期:
脫水培養(yǎng)基:10-30℃,保質(zhì)期二年。 制備好平板: 2-8℃,*多保存兩周。
結果判斷
霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基1 沙氏液體培養(yǎng)基 用于**的增菌培養(yǎng),還用于一次性使用衛(wèi)生用品**定性檢測。
2 沙氏瓊脂培養(yǎng)基 用于**的分離培養(yǎng),還用于一次性使用衛(wèi)生用品**菌落總數(shù)檢測。 國標
3 霉菌液體培養(yǎng)基 胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族維生素;葡萄糖提供能源;磷酸二氫鉀為緩沖劑;硫酸鎂提供必須的微量元素;氯霉素可抑制**的生長。
4 馬鈴薯瓊脂 用于霉菌的培養(yǎng) 國標
5 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA) 供霉菌和酵母菌計數(shù)及分離培養(yǎng)。 國標 ISO
6 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基(**營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基) 用于**培養(yǎng)及藥品和生物制品無菌檢查用 藥典
7 改良馬丁培養(yǎng)基 (**培養(yǎng)基) 用于**培養(yǎng)及藥品和生物制品無菌檢查用。 藥典
8 高鹽察氏培養(yǎng)基 用于飼料中霉菌的檢驗 國標
9 察氏培養(yǎng)基 用于培養(yǎng)能以硝酸鹽作為**氮源的**和**,及青霉和曲霉等霉菌的分離培養(yǎng)和形態(tài)鑒別。
10 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 藥典
11 孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅瓊脂) 供霉菌和酵母的計數(shù)、分離和培養(yǎng)用(GB/T4789.15-2010和化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗方法2007版)。 國標
12 亞利桑那菌瓊脂 用于亞利桑那菌選擇性分離培養(yǎng) FDA標準 藥典