大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基
(Chromogenic E.coli O157:H7 Agar)
用 途:
用于大腸桿菌O157:H7的快速分離和鑒定。(SN/T 1827-2006)
大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基原 理:
蛋白胨提供碳源和氮源;膽鹽抑制革蘭氏陽性菌的生長;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;混合碳水化合物為可發(fā)酵的糖類;中性紅是pH指示劑,**發(fā)酵糖產(chǎn)酸時(shí)菌落呈桃紅色;亞碲酸鉀抑制非大腸桿菌O157:H7菌的生長;混合色素與大腸桿菌O157:H7所具有的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團(tuán),在淺紅色平板上產(chǎn)生藍(lán)綠色的菌落。
配方(每升):
蛋白胨 8.6g
氯化鈉 5g
混合碳水化合物 25g
中性紅 0.015g
膽鹽 1.5g
混合色素 0.3g
瓊脂 15g
*終pH 7.0±0.2
大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基使用方法:
1、稱取本品55.4g,加入蒸餾水或去離子水1000毫升,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶。
2、待基礎(chǔ)培養(yǎng)基冷至50℃時(shí),每100毫升培養(yǎng)基加入1瓶(SR0200)無菌亞碲酸鉀溶液1mL,如樣品中含有較多的變型桿菌,可添加0.0025mg頭孢克肟至100毫升培養(yǎng)基中,混勻并傾注**培養(yǎng)皿,凝固后備用。
3、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液,用接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種于顯色平板上,置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。
4、觀察結(jié)果。挑取大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基平板上呈藍(lán)綠色,扁平透明,邊緣光滑,直徑約2mm的可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)。
5、對疑似大腸桿菌O157:H7菌落可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn)和O157:H7菌血清學(xué)試驗(yàn)。
質(zhì)量控制:
大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基傾注平皿后呈淺紅色,下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)生長情況如下表:
大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規(guī) 格:可配置1L的培養(yǎng)基干粉。
參考文獻(xiàn):
1.SN/T 1827-2006 中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 出口食品中產(chǎn)志賀**大腸桿菌檢驗(yàn)方法
大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基1 沙氏液體培養(yǎng)基 用于**的增菌培養(yǎng),還用于一次性使用衛(wèi)生用品**定性檢測。
2 沙氏瓊脂培養(yǎng)基 用于**的分離培養(yǎng),還用于一次性使用衛(wèi)生用品**菌落總數(shù)檢測。 國標(biāo)
3 霉菌液體培養(yǎng)基 胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族維生素;葡萄糖提供能源;磷酸二氫鉀為緩沖劑;硫酸鎂提供必須的微量元素;氯霉素可抑制**的生長。
4 馬鈴薯瓊脂 用于霉菌的培養(yǎng) 國標(biāo)
5 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA) 供霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)及分離培養(yǎng)。 國標(biāo) ISO
6 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基(**營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基) 用于**培養(yǎng)及藥品和生物制品無菌檢查用 藥典
7 改良馬丁培養(yǎng)基 (**培養(yǎng)基) 用于**培養(yǎng)及藥品和生物制品無菌檢查用。 藥典
8 高鹽察氏培養(yǎng)基 用于飼料中霉菌的檢驗(yàn) 國標(biāo)
9 察氏培養(yǎng)基 用于培養(yǎng)能以硝酸鹽作為**氮源的**和**,及青霉和曲霉等霉菌的分離培養(yǎng)和形態(tài)鑒別。
10 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 藥典
11 孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅瓊脂) 供霉菌和酵母的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用(GB/T4789.15-2010和化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗(yàn)方法2007版)。 國標(biāo)
12 亞利桑那菌瓊脂 用于亞利桑那菌選擇性分離培養(yǎng) FDA標(biāo)準(zhǔn) 藥典