pET41系列載體是設(shè)計用來克隆和高水平表達蛋白質(zhì)的載體,載體融合表達一個含有220個氨基酸的GST標簽蛋白純化片段。pET41a載體的單一的多克隆位點見上面的環(huán)狀質(zhì)粒圖譜。注意:載體序列是以pBR322質(zhì)粒的編碼規(guī)矩進行編碼的,所以T7蛋白表達區(qū)在質(zhì)粒圖譜上面是反向的。
T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標注了出來。質(zhì)粒的F1復制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。
pET-41a載體上面含有一個EK蛋白酶切位點,當將目的基因使用載體上面的PshAI限制性內(nèi)切酶位點插入進去時,可以通過EK蛋白酶將載體上的融合的所有氨基酸序列包括GST標簽序列,全部切除掉。