pET-47b(+)載體基本信息
別名: | pET47b, pET 47b |
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質(zhì)粒類型: | 大腸桿菌蛋白表達(dá) |
表達(dá)水平: | 高 |
克隆方法: | 多克隆位點(diǎn),限制性內(nèi)切酶 |
載體大小: | 5203 bp |
5' 測序引物及序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
3' 測序引物及序列: | T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
載體標(biāo)簽: | N-His, C-S, C-Thrombin |
載體抗性: | 卡那 |
表達(dá)宿主菌: | BL21(DE3) 、 Rosetta2(DE3)、C43(DE3) |
備注: |
載體含有HRV 3C蛋白酶切位點(diǎn),可以在低溫條件下將多余的融合表達(dá)蛋白切除。載體上還有C端Thrombin蛋白酶切位點(diǎn)可以使用。
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產(chǎn)品目錄號(hào): | 71461-3 |
穩(wěn)定性: | 瞬時(shí)表達(dá) Transient |
組成型: | 組成型 Constitutive |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pET47b載體攜帶有N端His純化標(biāo)簽,緊跟著有一個(gè)HRV 3C蛋白酶切位點(diǎn)。這個(gè)HRV 3C蛋白酶切位點(diǎn)能夠特異性的高效 切割 “LEVLFQ↓GP”氨基酸序列,酶活力在低溫下很強(qiáng)。pET-50b(+)載體上還含有一個(gè)可選擇的C端Thrombin蛋白酶切位點(diǎn)和S標(biāo)簽序列。 pET-47b(+)載體的單一的多克隆位點(diǎn)見上面的環(huán)狀質(zhì)粒圖譜。注意:載體序列是以pBR322質(zhì)粒的編碼規(guī)矩進(jìn)行編碼的,所以T7蛋白表達(dá)區(qū)在質(zhì)粒圖譜上面是反向的。 T7 RNA聚合酶啟動(dòng)的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動(dòng)蛋白表達(dá),同時(shí)蛋白表達(dá)將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。