闡明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能是后基因組研究的一個重要課題。高效率的蛋白質(zhì)表達系統(tǒng)是研究這些課題的不可缺少的基本技術(shù)。大腸桿菌作為宿主的表達系統(tǒng)中被廣泛 使用于生產(chǎn)重組蛋白。大腸桿菌表達系統(tǒng)具有良好的優(yōu)勢,方法簡單，成本低。然而，對于某些基因，蛋白表達很困難，表達的蛋白質(zhì)不溶。

為了解決這些問題，TAKARA與Masayori Inouye教授（美國新澤西醫(yī)學(xué)和牙科大學(xué)）進行聯(lián)合研究，以制定一個高效基于低溫冷休克蛋白基因的大腸桿菌表達載體。pCold DNA系列產(chǎn)品具有上述的優(yōu)點，并提供了一個重要功能和結(jié)構(gòu)的分析以及其他蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的工具。

<產(chǎn)品概況和特點>
當(dāng)培養(yǎng)的大腸桿菌的溫度充分降低，幾乎暫時停止生長大部分的蛋白表達減少，而此時一組蛋白質(zhì)稱為“冷休克蛋白”被專門誘導(dǎo)表達。

冷休克表達載體，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA啟動子設(shè)計高效率蛋白質(zhì)表達載體。 CSPA的啟動子的下游處，插入了lac操縱子，以便嚴(yán)格控制表達。此外，5'非翻譯區(qū)（5'UTR），翻譯增強元件（TEE），His標(biāo)簽序列，Xa因 子切割位點和多克隆位點（MCS）位于在CSPA啟動子的下游的。由于該產(chǎn)品采用了大腸桿菌的啟動子，大多數(shù)大腸桿菌菌株可被用作表達宿主。有四種類型的 pCold載體，他們的下列原件的位置稍有不同，TEE，His標(biāo)簽序列和Factor XA酶切位點。