pCold ProS2 DNA 是一種融合的冷休克表達(dá)載體,使用來源于革蘭氏陰性菌Myxococcus xanthus中的Protein S作為可
溶性標(biāo)簽。這種Protein S存在于粘**的孢子衣中,由173個(gè)氨基酸殘基組成,是一種非常穩(wěn)定的可溶性蛋白質(zhì)。將兩
個(gè)Protein S的N-末端結(jié)構(gòu)域串聯(lián),再結(jié)合ProS2 Tag的作用,就能使融合目的蛋白的穩(wěn)定性和可溶性得到提高。此外,
由于目的蛋白和ProS2-Tag的相互作用性很低,因此可以將二者有效分離。
pCold ProS2 DNA Vector在cspA啟動(dòng)子的下游插入了5’非編碼區(qū)(5’-UTR)、翻譯增強(qiáng)元件(TEE)、His-Tag序列、
ProS2-Tag和多克隆位點(diǎn)(MCS)。在ProS2-Tag和多克隆位點(diǎn)(MCS)之間主要是HRV3C Protease、Thrombin和Factor Xa
的切斷位點(diǎn),用來消除融合蛋白質(zhì)的標(biāo)簽。此外,在cspA啟動(dòng)子下游還插入了lac operator,可以嚴(yán)格調(diào)控目的基因的
表達(dá)。由于本制品的啟動(dòng)子是大腸桿菌來源的,所以大部分大腸桿菌都可以作為表達(dá)宿主使用??傊?,pCold ProS2 DNA
Vector提供的冷休克技術(shù),能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)的正確折疊,增加目的蛋白質(zhì)的可溶性,對(duì)于一些棘手的目的蛋白質(zhì)的表達(dá)
是一個(gè)很好的選擇。