pCold ProS2 DNA 是一種融合的冷休克表達載體,使用來源于革蘭氏陰性菌Myxococcus xanthus中的Protein S作為可
溶性標簽。這種Protein S存在于粘**的孢子衣中,由173個氨基酸殘基組成,是一種非常穩(wěn)定的可溶性蛋白質。將兩
個Protein S的N-末端結構域串聯(lián),再結合ProS2 Tag的作用,就能使融合目的蛋白的穩(wěn)定性和可溶性得到提高。此外,
由于目的蛋白和ProS2-Tag的相互作用性很低,因此可以將二者有效分離。
pCold ProS2 DNA Vector在cspA啟動子的下游插入了5’非編碼區(qū)(5’-UTR)、翻譯增強元件(TEE)、His-Tag序列、
ProS2-Tag和多克隆位點(MCS)。在ProS2-Tag和多克隆位點(MCS)之間主要是HRV3C Protease、Thrombin和Factor Xa
的切斷位點,用來消除融合蛋白質的標簽。此外,在cspA啟動子下游還插入了lac operator,可以嚴格調控目的基因的
表達。由于本制品的啟動子是大腸桿菌來源的,所以大部分大腸桿菌都可以作為表達宿主使用??傊?,pCold ProS2 DNA
Vector提供的冷休克技術,能夠促進蛋白質的正確折疊,增加目的蛋白質的可溶性,對于一些棘手的目的蛋白質的表達
是一個很好的選擇。