pET-32a(+)載體基本信息
別名: | pET32a, pet 32a |
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質(zhì)粒類型: | 大腸桿菌蛋白表達 |
表達水平: | 高 |
克隆方法: | 多克隆位點,限制性內(nèi)切酶 |
載體大小: | 5900bp |
5' 測序引物: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
3' 測序引物: | T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
載體標簽: | thioredoxin (N端); His (中間和C端) |
載體抗性: | 氨芐 |
備注: |
pET32a載體用于表達可溶性,具有活性功能的蛋白;pET-32a(+)載體具有N端Thrombin(凝血酶)酶切位點,N端腸激酶酶切位點。pET32啊,pET32b,pET32c載體的差異主要是在于多克隆位點,其他地方完全一致。 |
產(chǎn)品貨號: | 69015-3 |
穩(wěn)定性: | 瞬時表達 |
組成型: | 組成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pET32系列載體是設計用來克隆構建和高水平融合表達表達帶有109個氨基酸Trx標簽的蛋白質(zhì)序列。將基因插入到載體的多克隆位點,能夠獲得融合表達蛋白質(zhì)。同時融合蛋白包含有His標簽和S標簽,這些可以用于蛋白表達檢測和純化過程。
載體的多克隆位點見上面的圖譜。需要注意的是圖譜中的核苷酸編碼順序是以pBR322載體的復制方向為正方向,所以T7表達區(qū)域在圖譜中是處于反向的位置。T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標注了出來。質(zhì)粒的F1復制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。