pET-30a(+)載體攜帶有一個(gè)N端的His標(biāo)簽/Thrombin酶切位點(diǎn)/ S標(biāo)簽/ EK蛋白酶切標(biāo)簽以及一個(gè)可選擇的C端His標(biāo)簽。
載體的多克隆位點(diǎn)見上面的圖譜。需要注意的是圖譜中的核苷酸編碼順序是以pBR322載體的復(fù)制方向?yàn)檎较?,所以T7表達(dá)區(qū)域在圖譜中是處于反向的位 置。T7 RNA聚合酶啟動(dòng)的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動(dòng)蛋白表達(dá),同時(shí)蛋白表達(dá)將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。