pET-42a(+)載體基本信息
別名: | pET42a, pET 42a, pET-42a |
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質(zhì)粒類型: | 大腸桿菌蛋白表達(dá) |
表達(dá)水平: | 高 |
克隆方法: | 多克隆位點(diǎn),限制性內(nèi)切酶 |
載體大小: | 5930 bp |
5' 測序引物及序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'; pGEX-5': 5'-GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG-3' |
3' 測序引物及序列: | T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
載體標(biāo)簽: | N-GST, N-His, N-S, C-His, N-Thrombin, N-Factor Xa |
載體抗性: | 卡那 |
備注: |
pET42a,b,c的差異主要是在多克隆位點(diǎn)處。
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產(chǎn)品目錄號: | 70561-3 |
穩(wěn)定性: | 瞬時(shí)表達(dá) |
組成型: | 組成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pET42系列載體是用來進(jìn)行克隆和高水平表達(dá)含有220個(gè)氨基酸的GST融合純化標(biāo)簽的蛋白表達(dá)載體。 pET42a載體的單一的多克隆位點(diǎn)見上面的環(huán)狀質(zhì)粒圖譜。注意:載體序列是以pBR322質(zhì)粒的編碼規(guī)矩進(jìn)行編碼的,所以T7蛋白表達(dá)區(qū)在質(zhì)粒圖譜上面是反向的。T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動蛋白表達(dá),同時(shí)蛋白表達(dá)將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。 把表達(dá)的基因插入到載體的PshAI限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)時(shí),可以通過Factor Xa蛋白酶將融合表達(dá)的GST標(biāo)簽完全切除。