pRSET A載體是從pUC的載體衍生而來,載體設(shè)計(jì)的目的是為了在大腸桿菌中高水平的表達(dá)和純化目的克隆基因。載體上的T7啟動(dòng)子使得pRSETA載體高水平表達(dá)克隆的基因序列成為可能。
此外,DNA插入片段的位于載體上面的下游側(cè),并能夠上游的蛋白編碼框相一致,上游的編碼序列表達(dá)了一個(gè)N-端融合的肽。該序列包括一個(gè)ATG翻譯起始密碼子,一個(gè)6 X His標(biāo)簽,一個(gè)來源于噬菌體T7基因10的轉(zhuǎn)錄穩(wěn)定序列,Xpress抗原表位,以及一個(gè)腸激酶裂解識(shí)別序列。
His 標(biāo)簽允許簡單的Ni柱蛋白純化。腸激酶識(shí)別位點(diǎn)位于His標(biāo)簽和重組蛋白之間,可以隨后方便的去除重組蛋白的N-端的融合肽。