pNLF1-secN [CMV/Hygro] Vector sequence reference points:

Base pairs                                                   6005
CMV immediate early enhancer/promoter                        1–742
Chimeric intron                                              857–989
T7 RNA polymerase promoter                                   1033–1052
secNanoLuc® protein coding region                            1067–1663
Linker                                                       1664–1675
Multiple cloning region                                      1676–1751
SV40 late poly(A) region                                     1814–2035
SV40 early enhancer/promoter                                 2134–2546
Synthetic hygromycin (Hygr) coding region                    2577–3614
Synthetic poly(A) signal                                     3638–3686
β-lactamase (Ampr) coding region                             3947–4807
ColE1-derived plasmid replication origin                     4962–4998 

NanoLuc螢光素酶融合表達(dá)載體pNLF1-secN

更?。?9.1kDa）、更亮（比螢火蟲和海腎螢光素酶亮度高 100 倍）的 NanoLuc螢光素酶（Nluc）非常適用于蛋白融合應(yīng)用。NanoLuc 融合蛋白應(yīng)用廣泛：作為蛋白穩(wěn)定性報(bào)告基因、生物發(fā)光法細(xì)胞成像（BLI）探針或作為供體信號(hào)用于生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）研究蛋白: 蛋白或蛋白: 小分子相互作用研究。
NanoLuc 蛋白融合載體可方便的 N- 或 C-端融合 Nluc 和您感興趣蛋白的融合蛋白；有兩類形式載體可供選擇：
pNLF 載體系列：產(chǎn)生 N- 或 C- 端融合全長(zhǎng) Nluc 的融合蛋白或應(yīng)用傳統(tǒng)的克隆方法（多克隆位點(diǎn)）將分泌型 Nluc 克隆到感興趣的蛋白 N 端。 
pF 載體系列：使用 Flexi Vector Cloning System 產(chǎn)生 N- 端或 C- 端融合蛋白；Flexi Vector Cloning System 是一種直接克隆方法，基于兩種稀有酶切位點(diǎn) SgfI 和 PmeI，可以在 Flexi 載體之間轉(zhuǎn)換蛋白編碼序列，快速、高效和高保真。

特點(diǎn) - 優(yōu)點(diǎn)
 輕松定量蛋白豐度變化：使用 Nano-Glo Luciferase Assay System 進(jìn)行單一試劑加樣，來定量 NanoLuc 融合蛋白的信號(hào)，進(jìn)而檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白水平。
 生物相關(guān)性更高：NanoLuc 報(bào)告基因光信號(hào)更強(qiáng)，內(nèi)源性表達(dá)水平的 NanoLuc 融合蛋白即可被檢測(cè)到，可避免過度表達(dá)造成的假象。
 使蛋白的細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化可視化：NanoLuc 報(bào)告基因光信號(hào)更強(qiáng)，縮短了成像曝光時(shí)間，無需反復(fù)激發(fā)樣本，從而降低了激發(fā)造成的細(xì)胞毒性反應(yīng)。
 改進(jìn) BRET 研究技術(shù)：NanoLuc 擁有更強(qiáng)的光信號(hào)，藍(lán)移的發(fā)射光譜，因而與熒光受體的光譜交叉更少，信噪比更佳，動(dòng)態(tài)范圍更寬。
 靈活的克隆選擇：可使用傳統(tǒng)克隆方法或 Flexi 克隆系統(tǒng)輕松將 NanoLuc 與目標(biāo)蛋白的 C 端或 N 端融合。
 可實(shí)現(xiàn)從瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的輕松過渡：所有載體都含有用于建立穩(wěn)定細(xì)胞系的哺乳動(dòng)物篩選標(biāo)志物。

應(yīng)用
 化合物篩選
 蛋白: 蛋白相互作用
 蛋白: 小分子相互作用
 生物發(fā)光成像
 蛋白穩(wěn)定性研究