Lonza生物公司的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表達(dá)系統(tǒng)載體pEE6.4載體,利用谷氨酰胺合成酶篩選標(biāo)記,能夠高水平的在哺乳細(xì)胞內(nèi)表達(dá)目的基因。
GS酶是生物體內(nèi)以谷氨酸和氨為底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能夠被甲硫氨酸砜亞胺(methionine sulphoximine,MSX)選擇性的抑制。一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞,例如小鼠骨髓瘤細(xì)胞(NSO細(xì)胞系)無法表達(dá)GS,所以在不添加谷氨酰胺的情況下, 細(xì)胞將無法生長(zhǎng)。對(duì)于這些細(xì)胞系,在無谷氨酰胺的培養(yǎng)基內(nèi),一個(gè)轉(zhuǎn)染的GS基因可以作為一個(gè)篩選標(biāo)記。其他的一些細(xì)胞系,例如CHO-KI,能夠產(chǎn)生內(nèi)源 性的GS酶。對(duì)于這些細(xì)胞,在無谷氨酰胺培養(yǎng)基內(nèi),在高水平足夠抑制GS酶合成的MSX(甲硫氨酸砜亞胺)的作用下,可以對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)提供一個(gè)選擇壓力。
1992年,Bebbington等**報(bào)道了使用GS基因細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)重組的抗體。該載體能夠被用來構(gòu)建快速,高產(chǎn)量,穩(wěn)定的單克隆抗體表達(dá)細(xì)胞系。