pMIR-Report Luciferase載體基本信息
載體名稱: | pMIR-Report Luciferase |
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質(zhì)粒類型: | 哺乳動物細(xì)胞miRNA表達(dá)報告載體,熒光報告載體 |
高拷貝/低拷貝: | 高拷貝 |
啟動子: | CMV |
克隆方法: | 多克隆位點,限制性內(nèi)切酶 |
載體大小: | 6470bp |
5' 測序引物及序列: | Luc-F: AGTCAAGTAACAACCGCGA; |
3' 測序引物及序列: | -- |
載體標(biāo)簽: | N-Luciferase(熒光素酶) |
載體抗性: | 氨芐抗性 |
篩選標(biāo)記: | 嘌呤霉素 |
備注: | 本載體是用來克隆插入miRNA靶序列,評估細(xì)胞內(nèi)miRNA功能的載體。 |
產(chǎn)品目錄號: | AM5795 |
穩(wěn)定性: | 瞬時表達(dá), 穩(wěn)定表達(dá)都可以 |
組成型: | 非組成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pMIR-REPORT miRNA表達(dá)報告基因載體系統(tǒng)由一個實驗螢火蟲熒光素酶報告載體和相關(guān)的β-半乳糖苷酶報告對照質(zhì)粒組成。通過在多克隆位點插入預(yù)測的miRNA靶序列, pMIR-REPORT熒光素酶報告miRNA表達(dá)報告載體可以被用來進行準(zhǔn)確的,定量的,評估細(xì)胞內(nèi)miRNA的功能。它也可以被用來檢測siRNA的靶位點和分析3'端非編碼區(qū)序列對基因表達(dá)的影響。 pMIR-REPORT Luciferase載體包含一個CMV啟動子和終止子控制下的螢火蟲熒光素酶報告基因。在熒光素酶基因的3'端非編碼區(qū)包含一個多克隆位點,用于插入的預(yù)測miRNA的結(jié)合靶序列或其他核苷酸序列。通過將預(yù)測的miRNA靶序列克隆插入到pMIR-REPORT載體,熒光素酶報告表達(dá)就收到調(diào)節(jié)。這模仿的miRNA靶序列的作用方式。
pMIR-REPORT β-gal質(zhì)粒是一個β-半乳糖苷酶報告質(zhì)粒,其被設(shè)計用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作流程的標(biāo)準(zhǔn)化探索。 該對照質(zhì)粒表達(dá)的β-半乳糖苷酶,可以用來標(biāo)準(zhǔn)化由于細(xì)胞活力和轉(zhuǎn)染效率差異導(dǎo)致的細(xì)胞表達(dá)水平的多樣性。
作為附加的功能,pMIR-REPORT Luciferase和pMIR-REPORT β-gal分別含有嘌呤霉素和新霉素抗性基因,這可以用于選擇轉(zhuǎn)染成功的哺乳動物細(xì)胞。研究需要的話,***選擇可用于構(gòu)建pMIR-REPORT載體質(zhì)粒穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系。對于大多數(shù)應(yīng)用,瞬表達(dá)是足夠的,***的篩選也是沒有必要的。