HMC-1人肥大細胞HMC1 Cell
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種屬
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人
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別稱
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HMC1
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組織來源
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癌細胞系
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肥大細胞白血病
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傳代比例/細胞消化
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1:2傳代
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完全培養(yǎng)基配置
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IMDM培養(yǎng)基 ；10%胎牛血清 ；1%雙抗
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形態(tài)
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細胞樣
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生長特征
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懸浮生長
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STR
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Amelogenin X CSF1PO 10,13 D2S1338 17,25 D3S1358 15 D5S818 12,13 D7S820 10,11 D8S1179 12
D13S317 10,11 D16S539 10,12 D18S51 14,20 D19S433 14 D21S11 29 FGA 18,20 Penta D 11
Penta E 9,19 TH01 7,9.3 TPOX 8,11 vWA 17,19
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倍增時間
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每周 2-3次
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
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凍存條件
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凍存液：90%FBS，DMSO 10%,
或使用非程序凍存液：
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備注
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該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液，請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。
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產(chǎn)品使用
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于科學研究，不可作為動物或人類的產(chǎn)品使用。
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傳代方法
顯微鏡下觀察細胞，當覆蓋80%底面積時，進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代，那樣細胞容易老化。在生物柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，按照1:3的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。
傳代密度均勻，有以下幾點比較重要：
1.盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹，一上來就加1-2ml胰酶，結(jié)果細胞團大片脫落，雖然有后續(xù)吹打步驟，但我覺得效果不佳。至于難消化的細胞，怎么掌握分寸，還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎上，我覺得細胞吹勻，這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細胞至離心管，加入培養(yǎng)液重懸混勻，吸管緩慢吹打20-30次，可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究，如6孔板中你終加入2ml細胞懸液，尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿，液體表面有張力，細胞易于聚集在中間，所以我一般6孔板再加1ml以消除影響，吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
來源于一名 52 歲男性肥大細胞白血病患者的外周血樣本。該細胞有多重亞型分別為：HMC-1 5C6，HMC-1.1 ，HMC-1.2 。廣泛用于人肥大細胞功能研究，因為它們表現(xiàn)出組織肥大細胞的許多關鍵特征，例如組胺、類胰蛋白酶、肝素和類似細胞表面抗原譜的表達 （1,2）。受體酪氨酸激酶 KIT 在肥大細胞上表達，在肥大細胞的增殖、功能和存活中起重要作用。KIT 中的激活突變與肥大細胞生長失調(diào)有關，并與肥大細胞腫瘤和系統(tǒng)性肥大細胞增多癥有關。據(jù)報道，HMC-1 細胞系中存在兩個 KIT 激活點突變 。這兩種突變都將受體轉(zhuǎn)化為組成型酪氨酸磷酸化和活性狀態(tài)，導致生長因子非依賴性增殖。HMC-1.1 （HMC-1（560）） 和 HMC-1.2 （HMC-1（560,816））是HMC-1 細胞系的兩個變異亞系。HMC-1.1 具有 V560G 突變，但不具有 D816V 突變。HMC-1.2 同時具有 V560G 和D816V 突變，并且表現(xiàn)出比 HMC-1.1 更高的增殖率。有人認為，HMC-1.2 的較高增殖潛力可能歸因于 D816V 突變
