HS766T【人胰腺癌細(xì)胞】代數(shù)低,狀態(tài)好,發(fā)貨快,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,種類齊全,價(jià)格優(yōu)惠,在做傳代細(xì)胞培養(yǎng)之前,首先將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下,觀察培養(yǎng)瓶中細(xì)胞是否已長(zhǎng)成致密單層,如已長(zhǎng)成單層,即可進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。
HS766T【人胰腺癌細(xì)胞】描述
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量:1×106個(gè)
細(xì)胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度:92.2%
細(xì)胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存:液氮凍存(完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和**
HS766T【人胰腺癌細(xì)胞】培養(yǎng)條件
1640,90%;上等胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
HS766T【人胰腺癌細(xì)胞】傳代方法
顯微鏡下觀察細(xì)胞,當(dāng)覆蓋80%底面積時(shí),進(jìn)行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時(shí)候才傳代,那樣細(xì)胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺(tái)中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細(xì)胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
HS766T【人胰腺癌細(xì)胞】傳代密度均勻,有以下幾點(diǎn)比較重要:
1.盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長(zhǎng)消化時(shí)間。我見過有些剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的師弟師妹,一上來就加1-2ml胰酶,結(jié)果細(xì)胞團(tuán)大片脫落,雖然有后續(xù)吹打步驟,但我覺得效果不佳。至于難消化的細(xì)胞,怎么掌握分寸,還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎(chǔ)上,我覺得細(xì)胞吹勻,這步比上述提到的十字移動(dòng)等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細(xì)胞至離心管,加入培養(yǎng)液重懸混勻,吸管緩慢吹打20-30次,可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會(huì)有講究,如6孔板中你*終加入2ml細(xì)胞懸液,尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿,液體表面有張力,細(xì)胞易于聚集在中間,所以我一般6孔板再加1ml以消除影響,吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)
293FT(人胚腎細(xì)胞)
HCC1937(人乳腺癌細(xì)胞)
HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞)
293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞))
LA795(小鼠肺腺癌細(xì)胞)
HBL-100(人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞)
293E(人胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾))
L Wnt-3A(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)
VE (人血管內(nèi)皮細(xì)胞)
TG-905 (人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
TE-13 (人食管癌細(xì)胞)
Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)
KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))
H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞)
SW1116(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
H-4-Ⅱ-E(大鼠肝細(xì)胞瘤)
SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞)
H4(人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
SF-295 (人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
GNM(人口腔鱗癌頸**結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞)
GBC-SD(人膽囊癌細(xì)胞)