A101D【人黑色素瘤細胞】代數低，狀態(tài)好，發(fā)貨快，細胞庫管理規(guī)范，種類齊全，價格優(yōu)惠，在做傳代細胞培養(yǎng)之前，首先將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下，觀察培養(yǎng)瓶中細胞是否已長成致密單層，如已長成單層，即可進行細胞的傳代培養(yǎng)。

A101D【人黑色素瘤細胞】描述

細胞生長：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞數量：1×10⁶個

細胞傳代：1:3傳代,2-3天傳一代

細胞純度：92.2％

細胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**

細胞凍存：液氮凍存（完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）

細胞運輸：干冰運輸（1 Vial）或活細胞運輸（T-25 flasks）

細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和**

A101D【人黑色素瘤細胞】培養(yǎng)條件

DMEM,90%；上等胎牛血清，10%

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%

溫度：37攝氏度

A101D【人黑色素瘤細胞】傳代方法

顯微鏡下觀察細胞，當覆蓋80%底面積時，進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代，那樣細胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，按照1:3的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。

A101D【人黑色素瘤細胞】傳代密度均勻，有以下幾點比較重要：

1.盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹，一上來就加1-2ml胰酶，結果細胞團大片脫落，雖然有后續(xù)吹打步驟，但我覺得效果不佳。至于難消化的細胞，怎么掌握分寸，還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。

2.在以上基礎上，我覺得細胞吹勻，這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細胞至離心管，加入培養(yǎng)液重懸混勻，吸管緩慢吹打20-30次，可配合水平搖晃離心管。

3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究，如6孔板中你*終加入2ml細胞懸液，尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿，液體表面有張力，細胞易于聚集在中間，所以我一般6孔板再加1ml以消除影響，吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。

3T6-Swiss albino（小鼠胚胎成纖維細胞）
CTLA4 Ig-24（中國倉鼠卵巢細胞）
Ishikawa （人**內膜癌細胞）
HO-8910PM （人高轉移卵巢癌細胞）
HELF （人胚肺成纖維細胞）
HEL （人紅白細胞白血病細胞）
UMNSAH/DF-1（雞胚成纖維細胞）
HCCLM3（人高轉移肝癌細胞）
HCC 94 [HCC941122]（人**鱗癌細胞(高分化)）
H-97 （人高轉移肝癌細胞）
NCI-H1395（人肺腺癌細胞）
EJ （人膀胱癌細胞）
ECV-304（人臍靜脈內皮細胞）
EA.hy926（人臍靜脈細胞融合細胞）
D283 Med（人腦髓母細胞瘤細胞）
CRT （人神經膠質瘤細胞）
CW-2（人結腸腺癌細胞）
COLO 201（人結直腸腺癌細胞）
CHO（倉鼠卵巢細胞）
CNE-2Z （人鼻咽癌細胞）