hEEC【人**內(nèi)膜上皮細(xì)胞】代數(shù)低,狀態(tài)好,發(fā)貨快,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,種類(lèi)齊全,價(jià)格優(yōu)惠,在做傳代細(xì)胞培養(yǎng)之前,首先將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下,觀察培養(yǎng)瓶中細(xì)胞是否已長(zhǎng)成致密單層,如已長(zhǎng)成單層,即可進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。
hEEC【人**內(nèi)膜上皮細(xì)胞】描述
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量:1×106個(gè)
細(xì)胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度:92.2%
細(xì)胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存:液氮凍存(完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1
Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25
flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和**
hEEC【人**內(nèi)膜上皮細(xì)胞】培養(yǎng)條件
EMEM,90%;上等胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
hEEC【人**內(nèi)膜上皮細(xì)胞】傳代方法
顯微鏡下觀察細(xì)胞,當(dāng)覆蓋80%底面積時(shí),進(jìn)行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時(shí)候才傳代,那樣細(xì)胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺(tái)中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細(xì)胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
hEEC【人**內(nèi)膜上皮細(xì)胞】傳代密度均勻,有以下幾點(diǎn)比較重要:
1.盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長(zhǎng)消化時(shí)間。我見(jiàn)過(guò)有些剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的師弟師妹,一上來(lái)就加1-2ml胰酶,結(jié)果細(xì)胞團(tuán)大片脫落,雖然有后續(xù)吹打步驟,但我覺(jué)得效果不佳。至于難消化的細(xì)胞,怎么掌握分寸,還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎(chǔ)上,我覺(jué)得細(xì)胞吹勻,這步比上述提到的十字移動(dòng)等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細(xì)胞至離心管,加入培養(yǎng)液重懸混勻,吸管緩慢吹打20-30次,可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺(jué)得培養(yǎng)液的量可能也會(huì)有講究,如6孔板中你*終加入2ml細(xì)胞懸液,尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿,液體表面有張力,細(xì)胞易于聚集在中間,所以我一般6孔板再加1ml以消除影響,吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
RCHACV細(xì)胞 RCHACV 無(wú)
BJAB【人B細(xì)胞**瘤細(xì)胞】 D131 BJAB 人B細(xì)胞**瘤細(xì)胞 人 1640 懸浮
GES-1【人胃粘膜細(xì)胞】? D422 GES-1? 人胃粘膜細(xì)胞 人 1640 貼壁
Toledo【人B**細(xì)胞株瘤細(xì)胞】 D430 Toledo 人B**細(xì)胞株瘤細(xì)胞 人 IMDM 懸浮
9L【小鼠膠質(zhì)瘤】 D431 9L 小鼠膠質(zhì)瘤 小鼠 DMEM 貼壁
MLE-12【小鼠肺上皮細(xì)胞】 D432 MLE-12 小鼠肺上皮細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
KBM5【人慢性髓白血病細(xì)胞細(xì)胞】 D436 KBM5 人慢性髓白血病細(xì)胞細(xì)胞 人 IMDM 懸浮
VSC4.1【脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元瘤細(xì)胞系】 D453 VSC4.1 脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元瘤細(xì)胞系 人 EMEM 貼壁
HIC【人小腸癌細(xì)胞系】 D437 HIC 人小腸癌細(xì)胞系 人 1640 貼壁
LN-18【人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞】 D438 LN-18 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人 DMEM 貼壁
Kupffer【肝枯否細(xì)胞】 D439 Kupffer 肝枯否細(xì)胞 1640或DMDM 貼壁
SNU475【人肝癌細(xì)胞】 D460 SNU475 人肝癌細(xì)胞 人 1640 貼壁