H3396【人乳腺癌細(xì)胞系】發(fā)貨時(shí),保證細(xì)胞處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期;貼壁細(xì)胞達(dá)到75%以上匯合度,約1×106/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶;傳代次數(shù)4代以內(nèi);凍存細(xì)胞發(fā)2個(gè)凍存管;無(wú)微生物污染。
H3396【人乳腺癌細(xì)胞系】描述
細(xì)胞生長(zhǎng):見說(shuō)明書
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量:1×106個(gè)
細(xì)胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度:92.2%
細(xì)胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存:液氮凍存(完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和**
H3396【人乳腺癌細(xì)胞系】培養(yǎng)條件
見說(shuō)明書,90%;上等胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
收到細(xì)胞后如何操作:
首先,觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)及時(shí)與我司聯(lián)系。
用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出進(jìn)行觀察。仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管中,備用;細(xì)胞傳代時(shí),可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
建議客戶收到細(xì)胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)支持溝通交流。
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,并開啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。
2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái),以利于空氣的流通;實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。
3.每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。
4.操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。
5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔**。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,*后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無(wú)菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。
6.定期清洗或更換超凈臺(tái)過(guò)濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
H22細(xì)胞 小鼠肝癌細(xì)胞 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
H9細(xì)胞 人T**瘤細(xì)胞 1640+10%FBS+2mM GLU + 1%P/S 懸浮
H9C2 細(xì)胞 大鼠心肌細(xì)胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
Hacat細(xì)胞 人永生化纖維細(xì)胞 DMEM+15%FBS+1%P/S (STR鑒定后已確定)
HA-VSMC細(xì)胞 人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞 F12K+10%FBS+0.05 mg/ml抗壞血酸+ 0.01 mg/ml胰島素+0.01 mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白+10 ng / ml亞硒酸鈉+ 0.03 mg/ml(ECGS)+10 mM HEPES+10 mM TES+1%P/S 貼壁
HBMEC細(xì)胞 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 ECM+5%FBS+1%內(nèi)皮因子+1%P/S
HBZY-1細(xì)胞 大鼠腎小球系膜細(xì)胞 DMEM+10%FBS+1%P/S
HCC-78細(xì)胞 人肺腺癌細(xì)胞 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
HCC827細(xì)胞 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
HCC94細(xì)胞 人**鱗癌細(xì)胞(高分化) 1640+10%FBS+1%P/S
HCC-LM3細(xì)胞 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
HCT116細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S
HCT-8細(xì)胞 人回盲腸癌細(xì)胞 " 1640+10%FBS+1%P/S
"
HCT-15細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞 1640+10%FBS+1%P/S 已做str鑒定
HCT-8/FU細(xì)胞 人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株 1640+10%FBS+1%P/S +20ug/ml 5-FLU