CD45抗體做wb時(shí)，一抗和二抗?jié)舛仁窃趺创_定的？怎么設(shè)置抗體滴度：

一抗的用量和樣品中的目標(biāo)分子含量相關(guān)，如果含量較高，就不需要用太多一抗，以免浪費(fèi)和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度（義翹神州會(huì)提供抗體用量、天然細(xì)胞株檢測(cè)結(jié)果），如果樣品與廠家的不是一種細(xì)胞，可以嘗試上下摸索一兩個(gè)濃度梯度；

二抗的用量，和你所在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的用量就可以，如果出現(xiàn)效果不理想的狀態(tài)，二抗的作用可以通過(guò)陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照、以及其他人的使用效果看出來(lái)有沒(méi)有問(wèn)題。

英文名稱：CD45抗體

中文名稱白細(xì)胞共同抗原CD45抗體

別    名B220; CD 45; CD-45; CD45; cd45 antigen; ec3.1.3.48; CD45R; GP180; GP180; GP 180; L CA; LCA; L-CA; Leukocyte common antigen; LY5; Ly-5 glycoprotein; Protein tyrosine phosphatase receptor type C; Protein tyrosine phosphatase receptor type c polypeptide; protein tyrosine phosphatase, receptor type, C; Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C; PTPRC; PTPRC_HUMAN; SCID due to PTPRC deficiency; T200; T200 glycoprotein; T200 leukocyte common antigen; Human homolog of severe combined immunodeficiency due to PTPRC deficiency.  

JournalPMIDIFApplicationBMC Cancer (2015)264724663.3600IHC-P

說(shuō) 明 書(shū)50ul  100ul  200ul

研究領(lǐng)域細(xì)胞生物  **學(xué)  神經(jīng)生物學(xué)  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)  干細(xì)胞  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  細(xì)胞表面分子  糖蛋白  細(xì)胞類型標(biāo)志物  自然殺傷細(xì)胞  **細(xì)胞  t-**細(xì)胞  b-**細(xì)胞  細(xì)胞膜蛋白  

抗體來(lái)源Rabbit

克隆類型Polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit,

產(chǎn)品應(yīng)用WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 Flow-Cyt=1μg/Test （石蠟切片需做抗原修復(fù)）

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

CD45抗體分 子 量143kDa

細(xì)胞定位細(xì)胞膜

性    狀Lyophilized or Liquid

濃    度1mg/1ml

免 疫 原KLH conjugated synthetic peptide derived from human CD45 (1210-1251aa)

亞    型IgG

純化方法affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

CD45抗體ELISA如何選一抗與二抗：

一抗是與底物相結(jié)合的，同時(shí)一抗必須有抗原識(shí)別位點(diǎn)，能被另一種抗體識(shí)別并結(jié)合。

二抗是能與一抗的抗原識(shí)別位點(diǎn)識(shí)別并結(jié)合，同時(shí)，二抗必須有可以觀測(cè)、計(jì)量的性質(zhì)。

這些性質(zhì)可以是：

①二抗本身帶有顏色，可以通過(guò)分光度儀檢測(cè)到二抗的濃度；

②二抗還可以作為一種酶，催化另一種底物，通過(guò)檢測(cè)底物或者生成物的濃度檢測(cè)出二抗的濃度；等等……有很多，就是說(shuō)必須是可測(cè)量的。

CD45抗體保存得當(dāng)與否，直接決定了抗體的活性和使用效果！如果抗體保存得當(dāng)，大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心20-30s后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存！抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管，只有在12000rpm離心20-30s才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來(lái)。即使是在10000rpm離心也會(huì)導(dǎo)致離心不完全，導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象！