Vimentin抗體做wb時(shí)，一抗和二抗?jié)舛仁窃趺创_定的？怎么設(shè)置抗體滴度：

一抗的用量和樣品中的目標(biāo)分子含量相關(guān)，如果含量較高，就不需要用太多一抗，以免浪費(fèi)和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度（義翹神州會(huì)提供抗體用量、天然細(xì)胞株檢測(cè)結(jié)果），如果樣品與廠家的不是一種細(xì)胞，可以嘗試上下摸索一兩個(gè)濃度梯度；

二抗的用量，和你所在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的用量就可以，如果出現(xiàn)效果不理想的狀態(tài)，二抗的作用可以通過陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照、以及其他人的使用效果看出來(lái)有沒有問題。

英文名稱：Vimentin抗體

中文名稱波形蛋白單克隆抗體

別    名FLJ36605; OTTHUMP00000019224; VIM; VIME_HUMAN; Vimentin.  

說 明 書50ul  100ul  

研究領(lǐng)域腫瘤  細(xì)胞生物  發(fā)育生物學(xué)  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)  干細(xì)胞  

抗體來(lái)源Mouse

克隆類型Monoclonal

克 隆 號(hào)3B7

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat,

Vimentin抗體產(chǎn)品應(yīng)用WB=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ICC=1:20-200 IF=1:100-500 （石蠟切片需做抗原修復(fù)）

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

分 子 量53kDa

細(xì)胞定位細(xì)胞漿 細(xì)胞外基質(zhì)

性    狀Lyophilized or Liquid

濃    度1mg/1ml

免 疫 原Recombinant human Vimentin Protein

亞    型IgG

純化方法affinity purified by Protein G

儲(chǔ) 存 液0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

Vimentin抗體ELISA如何選一抗與二抗：

一抗是與底物相結(jié)合的，同時(shí)一抗必須有抗原識(shí)別位點(diǎn)，能被另一種抗體識(shí)別并結(jié)合。

二抗是能與一抗的抗原識(shí)別位點(diǎn)識(shí)別并結(jié)合，同時(shí)，二抗必須有可以觀測(cè)、計(jì)量的性質(zhì)。

這些性質(zhì)可以是：

①二抗本身帶有顏色，可以通過分光度儀檢測(cè)到二抗的濃度；

②二抗還可以作為一種酶，催化另一種底物，通過檢測(cè)底物或者生成物的濃度檢測(cè)出二抗的濃度；等等……有很多，就是說必須是可測(cè)量的。

Vimentin抗體保存得當(dāng)與否，直接決定了抗體的活性和使用效果！如果抗體保存得當(dāng)，大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心20-30s后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存！抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管，只有在12000rpm離心20-30s才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來(lái)。即使是在10000rpm離心也會(huì)導(dǎo)致離心不完全，導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象！