HCA25a抗體做wb時，一抗和二抗?jié)舛仁窃趺创_定的？怎么設(shè)置抗體滴度：

一抗的用量和樣品中的目標分子含量相關(guān)，如果含量較高，就不需要用太多一抗，以免浪費和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度（義翹神州會提供抗體用量、天然細胞株檢測結(jié)果），如果樣品與廠家的不是一種細胞，可以嘗試上下摸索一兩個濃度梯度；

二抗的用量，和你所在實驗室常規(guī)的用量就可以，如果出現(xiàn)效果不理想的狀態(tài)，二抗的作用可以通過陽性對照和陰性對照、以及其他人的使用效果看出來有沒有問題。

英文名稱：HCA25a抗體

中文名稱肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25a

別    名ENSG00000196977; Hepatocellular carcinoma associated antigen HCA25a; LOC728375.  

說 明 書100ul  200ul

研究領(lǐng)域腫瘤  

抗體來源Rabbit

克隆類型Polyclonal

交叉反應 Human,

產(chǎn)品應用WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 （石蠟切片需做抗原修復）

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

HCA25a抗體分 子 量15kDa

性    狀Lyophilized or Liquid

濃    度1mg/1ml

免 疫 原KLH conjugated synthetic peptide derived from human HCA25a

亞    型IgG

純化方法affinity purified by Protein A

儲 存 液0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

HCA25a抗體ELISA如何選一抗與二抗：

一抗是與底物相結(jié)合的，同時一抗必須有抗原識別位點，能被另一種抗體識別并結(jié)合。

二抗是能與一抗的抗原識別位點識別并結(jié)合，同時，二抗必須有可以觀測、計量的性質(zhì)。

這些性質(zhì)可以是：

①二抗本身帶有顏色，可以通過分光度儀檢測到二抗的濃度；

②二抗還可以作為一種酶，催化另一種底物，通過檢測底物或者生成物的濃度檢測出二抗的濃度；等等……有很多，就是說必須是可測量的。

HCA25a抗體保存得當與否，直接決定了抗體的活性和使用效果！如果抗體保存得當，大部分抗體活性都可以維持數(shù)月甚至數(shù)年。收到抗體后請務必在12000rpm離心20-30s后再打開管蓋進行分裝和保存！抗體使用非常特殊的儲存管，只有在12000rpm離心20-30s才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會導致離心不完全，導致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象！