RANK抗體做wb時,一抗和二抗?jié)舛仁窃趺创_定的?怎么設(shè)置抗體滴度:
一抗的用量和樣品中的目標分子含量相關(guān),如果含量較高,就不需要用太多一抗,以免浪費和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度(義翹神州會提供抗體用量、天然細胞株檢測結(jié)果),如果樣品與廠家的不是一種細胞,可以嘗試上下摸索一兩個濃度梯度;
二抗的用量,和你所在實驗室常規(guī)的用量就可以,如果出現(xiàn)效果不理想的狀態(tài),二抗的作用可以通過陽性對照和陰性對照、以及其他人的使用效果看出來有沒有問題。
英文名稱:RANK抗體
中文名稱核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體(核因子kB受體活化因子)
別 名TNFRSF11A; CD265; CD265 antigen; Activator of NFKB; EOF; FEO; mRANK; NFKB activator; ODFR; OFE; Osteoclast differentiation factor receptor; PDB 2; Receptor activator of NF KB; receptor activator of nuclear factor kappa B; TNFRSF 11A; TNFSF11; TRANCE R; RANK receptor; TNR11_HUMAN.
說 明 書50ul 100ul 200ul
研究領(lǐng)域腫瘤 細胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細胞表面分子
抗體來源Rabbit
克隆類型Polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat,
產(chǎn)品應(yīng)用WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 Flow-Cyt=1μg /test IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
RANK抗體分 子 量63-70kDa
細胞定位細胞膜
性 狀Lyophilized or Liquid
濃 度1mg/1ml
免 疫 原KLH conjugated synthetic peptide derived from human RANK C-terminus
亞 型IgG
純化方法affinity purified by Protein A
儲 存 液0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
RANK抗體ELISA如何選一抗與二抗:
一抗是與底物相結(jié)合的,同時一抗必須有抗原識別位點,能被另一種抗體識別并結(jié)合。
二抗是能與一抗的抗原識別位點識別并結(jié)合,同時,二抗必須有可以觀測、計量的性質(zhì)。
這些性質(zhì)可以是:
①二抗本身帶有顏色,可以通過分光度儀檢測到二抗的濃度;
②二抗還可以作為一種酶,催化另一種底物,通過檢測底物或者生成物的濃度檢測出二抗的濃度;等等……有很多,就是說必須是可測量的。
RANK抗體保存得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當,大部分抗體活性都可以維持數(shù)月甚至數(shù)年。收到抗體后請務(wù)必在12000rpm離心20-30s后再打開管蓋進行分裝和保存!抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm離心20-30s才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會導致離心不完全,導致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!