產(chǎn)品描述產(chǎn)品
在基因重組實驗中，常使用感受態(tài)細胞攝取外源DNA以制備基因文庫、重組質粒以及進行亞克隆等。
本品是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學轉化。經(jīng)使用pUC19質粒檢測，本品轉化效率可達108 cfu/μg，廣泛適用于高效的DNA克隆和質粒擴增，能保證高拷貝質粒的穩(wěn)定遺傳。本品適用于藍白斑篩選，另對recA1和endA1進行特定的改造使其更能保證克隆DNA的穩(wěn)定性以及更有利于高純度質粒DNA的提取。JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞
JM109感受態(tài)細胞基因型：recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 e14-(mcrA-) supE44 relA1 △(lac-proAB)/F’ [traD36 proAB+lac Iq lacZ △M15]。
運輸與保存方法
干冰運輸。
JM109感受態(tài)細胞-80℃保存，pUC19質粒-20℃保存。有效期半年。JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞
注意事項
1）感受態(tài)細胞應保存在-80℃，不可反復凍融和放置時間過長，以免降低感受態(tài)細胞的轉化效率。
2）整個轉化操作，嚴格根據(jù)相應溫度及無菌條件要求進行。
3）為確保*高轉化效率，整個操作過程應盡量輕柔，并保持低溫，避免移液槍吹吸。
JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞4）為防止轉化不成功，可以保留部分連接反應液，以重新轉化，*低化實驗可能遇到的風險。
使用方法
1）取100 μl感受態(tài)細胞置于冰浴中融化。
2）向100 μl感受態(tài)細胞懸液中加入2-10μl目的DNA或連接產(chǎn)物，輕輕旋轉離心管以混勻內容物，在冰浴中靜置20min。
3）將離心管置于42℃水浴中放置90s，然后快速將管轉移到冰浴中，使細胞冷卻2min，該過程不要搖動離心管。
4）向離心管中加入500μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含***），混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)60min（200 rpm）， 目的是促使菌體復蘇，抗性基因表達。
5）將離心管內容物混勻，根據(jù)實驗要求（質粒，重組連接產(chǎn)物轉化），吸取不同體積已轉化的感受態(tài)細胞加到含相應***的SOB或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌玻棒輕輕的將細胞均勻涂開。室溫正置10 min，待液體被吸收后，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 h。JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞
