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產(chǎn)品資料

Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

如果您對(duì)該產(chǎn)品感興趣的話,可以
產(chǎn)品名稱(chēng): Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào): Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)
產(chǎn)品展商: HZbscience
產(chǎn)品文檔: 無(wú)相關(guān)文檔

簡(jiǎn)單介紹

Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞是在具有大腸桿菌BL21菌株基礎(chǔ)上制備的化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的6種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)對(duì)應(yīng)的tRNA,Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞提供外源基因(尤其是真核基因)在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107 cfu/μg。


Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞  的詳細(xì)介紹

Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品描述

本品是在具有大腸桿菌BL21菌株基礎(chǔ)上制備的化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的6種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)對(duì)應(yīng)的tRNA,提供外源基因(尤其是真核基因)在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107 cfu/μg

本品具有氯霉素抗性。Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

運(yùn)輸和保存方法

干冰運(yùn)輸。

Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞于-80保存,pUC19質(zhì)粒≤-20保存。有效期半年。

注意事項(xiàng)

1)感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用,避免反復(fù)凍融。

2)待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后,請(qǐng)勿用移液槍吹打,輕輕彈勻即可。

3)為確保*高效率轉(zhuǎn)化,整個(gè)操作過(guò)程應(yīng)盡量輕柔,并保持低溫。Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

4)本品應(yīng)于-80保存,請(qǐng)勿將感受態(tài)細(xì)胞儲(chǔ)存于-20或液氮中保存。

5)整個(gè)轉(zhuǎn)化過(guò)程請(qǐng)于無(wú)菌條件下操作。

6)為了您的**和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)將感受態(tài)細(xì)胞從-80中取出,置于冰水浴中融化。

2)將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100 μl感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30分鐘。

Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞【注】: 通常100μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和;

 待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。

342水浴,不要晃動(dòng),準(zhǔn)確熱激45s后,立刻置于冰水浴中,靜置2-3分鐘。

4)向離心管中加入900 μl 不含***的LBSOC培養(yǎng)基,混勻。

5150 rpm, 37振蕩培養(yǎng)45分鐘,使菌體復(fù)蘇,抗性基因表達(dá)。

6)取適量已轉(zhuǎn)化細(xì)胞,加到含相應(yīng)***的固體培養(yǎng)基上,輕輕涂勻。剩余菌液可在4保存,一周之內(nèi)都可重新涂板。

【注】:如菌體量較少,也可2,500 g離心5分鐘,去掉900 μl上清。用剩余培養(yǎng)基將菌體重懸,用無(wú)菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。

7)室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后,37倒置培養(yǎng)過(guò)夜。Rosetta(DE3) Competent Cell Rosseta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

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